Seventh Commission Directive
of 1 March 1976
establishing Community methods of analysis for the official control of feedingstuffs
(76/372/EEC) (repealed)
F1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F1Article 1
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F1Article 2
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F1Article 3
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F1ANNEXDETERMINATION OF AFLATOXIN B1
F1A.ONE-DIMENSIONAL THIN LAYER CHROMATOGRAPHIC METHOD
F11.Purpose and scope
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F12.Principle
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F13.Reagents
F13.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.2.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.3.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.4.
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F13.5.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.6.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.7.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.8.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.9.
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F13.10.
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F13.11.
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F13.12.
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F13.13.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.14.
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F13.15.
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F13.16.
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F13.17.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.18.
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F13.18.1.
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F13.18.2.
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F13.18.3.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.18.4.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.18.5.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.Apparatus
F14.1.
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F14.2.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.3.
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F14.4.
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F14.5.
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F14.6.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.7.
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F14.8.
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F14.9.
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F14.10.
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F14.11.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.12.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.Procedure
F15.1.Preparation of the sample (see under‘Observations’, Part C, point 1).
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.2.Extraction
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F15.3.Column clean-up
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F15.4.Thin-layer chromatography
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F15.5.Quantitative determinations
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F15.5.1.Visual measurements
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.2.Measurements by fluorodensitometry
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.6.Confirmation of the identity of aflatoxin B1
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.6.1.Treatment with sulphuric acid
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.6.2.Two-dimensional chromatography involving the formation of aflatoxin B1-hemiacetal (aflatoxin B2a)
F15.6.2.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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F15.6.2.2.
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F15.6.2.3.
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F16.Calculation of the results
F16.1.From the visual measurements
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F16.2.From the fluorodensitometric measurements
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F17.Preparation and testing of the standard solution (3.16)
F17.1.Determination of the concentration of aflatoxinB1
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F17.2.Testing of chromatographic purity
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F18.Repeatability
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F19.Reproducibility
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F1B.DETERMINATION OF AFLATOXIN B1. HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHIC METHOD
F11.Purpose and scope
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F12.Principle
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.Reagents
F13.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.2.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.3.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.4.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.5.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.5.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.5.2.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.5.3.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.6.
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. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.7.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.8.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.9.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.10.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.11.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.12.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.12.1.
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F13.13.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.13.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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F13.13.2.
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F13.13.3.
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F13.13.4.
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F13.14.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.14.1.
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F13.15.
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F13.15.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F13.15.2.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.Apparatus
F14.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.2.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.3.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.4.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.5.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.6.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.7.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.8.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.9.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.10.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.11.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.12.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.13.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.14.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.15.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.16.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.17.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.18.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.19.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.20.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.21.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.22.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.23.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.24.
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F14.24.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F14.24.2.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.Procedure
F15.1.Preparation of the sample.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.2.Test portion.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.3.Extraction
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.4.Clean-up (the procedure should be carried out without significant interruptions).
F15.4.1.Florisil SEP-PAK purification
F15.4.1.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.4.1.2.
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F15.4.2.C18 SEP-PAK purification
F15.4.2.1.
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. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.4.2.2.
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. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.High performance liquid chromatography
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.1.HPLC pump settings
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.2.Post-column pump settings
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.3.Fluorescence detector
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.4.Injector
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.5.Check of chromatographic separation
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.6.Check of the stability of the system
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.7.Check of linearity
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. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F15.5.8.Injection of sample extracts
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F16.Confirmatory test
F16.1.Further treatment of the extract (5.4.2.2)
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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F16.2.Preparation of derivative and thin layer chromatography:
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F17.Calculation of results
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F17.1.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F18.Repeatability:
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F19.Reproducibility:
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F110.Observations
F110.1.Precision
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F110.2.Stabilization of chloroform (3.1)
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
F110.3.Accuracy
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. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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F1C.OBSERVATIONS CONCERNING METHODS A AND B
F11.Defatting
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F12.Reproducibility of the results for Method A
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Repealed by Commission Regulation (EC) No 152/2009 of 27 January 2009 laying down the methods of sampling and analysis for the official control of feed (Text with EEA relevance).